Page 418 - 《环境工程技术学报》2023年第1期
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promoting the apoptosis of zebrafish intestine.
Key words zebrafish (Danio Rerio); intestinal barrier; oxidative stress; inflammatory response; apoptosis;
decabromodiphenyl ether (BDE-209)
多溴联苯醚(PBDEs)是目前广泛使用的溴化阻 和毒害作用的理想模式生物 [22-23] 。研究表明,斑马鱼
燃 剂 。 由 于 低 负 荷 、 成 本 低 廉 且 阻 燃 效 率 高 , 胚胎暴露 于 80 µg/L BDE-20 溶 液 14 后,其体内
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PBDE 被广泛添加到消费品和材料中,以满足消防 甲状腺激素和下丘脑-垂体-甲状腺(HPT)轴基因转
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安 全 法 规 的 要 求 。PBDE 的 商 业 产 品 主 要有 录水平发生了显著改变 [24] 。稀有鮈鲫成年雄鱼暴露
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3 种,包括五溴联苯醚(penta-BDE)、八溴联苯醚 于 10 µg/L BDE-20 溶 液 21 后,睾丸出现精子生
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(octa-BDE)和十溴联苯醚(deca-BDE) 。研究表明, 成抑制现象,且肝脏甲状腺通路相关基因和睾丸凋
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PBDE 能借助大气和水等暴露介质进行远距离迁 亡相关基因转录水平发生组织特异性改变,BDE-
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移,具有较强的环境持久性、生物富集性和一定的生 20 暴露影响了稀有鮈鲫成年雄鱼甲状腺健康和正
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物毒性,因此许多国家和地区都限制或禁止其生产 常的生殖功能 [25] 。考虑到成鱼和胚胎对污染物耐受
和使用 [3-5] 。截 至 201 年,所 有 PBDE 商业产品均 程度的不同以及组织间的特异性,笔者将成年雄性
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被《斯德哥尔摩公约》列为有害物质 。尽管我国已 斑马鱼分别暴露 于 6、6 和 600 µg/ 的 BDE-20 溶
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禁用五溴和八溴联苯醚商业产品,但对十溴联苯醚 液 中 28 d,通过对斑马鱼肠道组织变化、氧化应激、
产品却并未禁止 。BDE-20 是十溴联苯醚商业产 炎症反应以及肠道屏障、炎症和凋亡相关基因的研
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品的主要成分,也是我国环境介质中最常检出的 究,探 讨 BDE-20 对斑马鱼肠道健康的潜在影响,以
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PBDE 单体同系物 。鉴于接 触 PBDE 会对动物和 期 为 BDE-20 对肠道的毒性效应及分子机制研究提
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人类造成重大的潜在健康风险,因此有必要探究其 供科学支持。
慢性暴露所产生的毒害效应。
1 材料与方法
流行病学和毒理学研究表明,PBDE 具有内分
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泌干扰毒性、神经毒性以及生殖发育毒性等一系列 1.1 化学品与试剂
毒性效应 [7-8] 。长期暴露 在 PBDE 环境中,会破坏机 BDE-209(CAS: 1163-19-5,纯度>98%)购自百灵
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体性激素和甲状腺激素的动态平衡,产生毒害作 威化学科技有限公司。二甲基亚砜(DMSO,CAS:
用 [9-10] 。在高剂量暴露时,PBDE 还表现出肝毒性、 67-68-5,HPL 级,纯度>99.9%)购自上海麦克林生
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免疫毒性和一定程度的致畸效应 [11-13] 。最近研究还 化科技有限公司。 将 BDE-20 粉末溶解 在 DMSO
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发现,BDE-20 暴露可通过氧化应激干扰小鼠肝脏 中,得 到 2 g/ 的储备原液。为避免光解,每 隔 2 d
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的脂质代谢,并激活 mTOR/PPARγ/RXR 信号通 用 DMS 重新配制储备原液,并将其储存在密封的
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路 [14] 。L 等 [15 ] 发 现 BDE-20 暴露会改 变 C57BL/6 棕色玻璃试剂瓶中。DMS 在测试溶液中的最终浓
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小鼠的肠道菌群结构并破坏胆囊酸的稳态。然而, 度不超 过 0.05%。
关 于 PBDE 对肠道组织的直接毒害作用却知之甚 1.2 斑马鱼驯养 和 BDE-20 暴露
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少。肠道不仅是生物体的重要消化代谢器官,也是 纯 种 A 系雄性斑马 鱼 (120 d 来自中国环境科
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最大的免疫器官,在生长发育、生物屏障、免疫调节 学研究院水生生物养殖室,驯养 在 (28±1) ℃ 的循环
以及糖脂代谢等生理功能和过程中起着至关重要的 水系统中,光暗周期 为 14 h∶10 h,循环水为充分曝气
作用 [16-17] 。肠道组织受损害将直接导致宿主机体功 并过滤脱氯的自来水。水质参数:p 为 7.0~7.5,溶
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能受损和疾病 [18] 。健康风险研究发现,饮食暴露是 解氧(DO)浓度为(6.9±0.5)mg/L,电导率为(0.256±
PBDE 较为重要的暴露途径,PBDE 通过在食品中 0.005)mS/cm,水的硬度为(185±9)mg/L( 以 CaCO
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积 累 进 入 生 物 体 , 从 而 使 肠 道 组 织 直 接 暴 露于 计)。在正式毒性暴露前,斑马鱼被驯 养 14 d。在此
PBDE 中 [3,19] 。鉴 于 BDE-20 在环境介质中大量且 期间,斑马鱼每天被喂食一次新鲜孵化的丰年虾。
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长期存在,其对肠道的致毒效应值得探究。 将 驯 化 后 的 斑 马 鱼 随 机 分 为 4 组 : 对 照 组
斑马鱼(Danio Rerio)是一种小型硬骨鱼,易于 (0.05% DMS 溶剂对照)以及 6、6 和 600 µg/L
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饲养和繁殖 [20-21] 。斑马鱼的基因与人类的基因高度 BDE-20 暴露组。每组包 括 3 个重复玻璃水箱,每
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相似,且斑马鱼和哺乳动物之间在肠道许多代谢功 个水箱 有 2 条雄性成鱼暴露 在 20 的指示溶液
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能与免疫功能上也是高度保守的,是研究肠道损伤 中。暴露期间每天固定时间喂斑马 鱼 1 次,每天更