Page 420 - 《环境工程技术学报》2023年第1期
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· 416 · 环境工程技术学报 第 13 卷
L8(rpl8)管家基因的转录水平进行归一化来评估基 不同浓度的 BDE-20 暴露还造成了肠道组织内
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因的相对表达量 。 MD 含量的显著上升,差异均有统计学意义。值得
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1.7 统计分析 注意的是,不同浓度 的 BDE-20 暴露还造成了斑马
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本研究中的数值 为 3 个重复的平均值±标准误 鱼肠道 内 CA 含量的显著升高。6 µg/L BDE-209
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差(SEM)。数据分布的正态性和方差的均匀性分别 暴露下虽未造 成 SO 含量的显著升高, 但 6 和 600
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用 Turke 和 Levene’ 检验进行评价。组间差异采 µg/ 暴露组与对照组有显著差异。 与 60 µg/ 暴露
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用单因素方差分析和事后比较进行显著性检验。使 组相比,600 µg/ 暴露组 的 SO 含量略有下降。
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用 Origin 202 软件进行数据分析和作图。P<0.05 2.3 BDE-20 对炎症相关指标的影响
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为统计学差异。 BDE-20 暴露后肠道内 TNF-α、IL-1 和 LPS
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含量变化如 图 3 所示。28 暴露后,各暴露 组 TNF-
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2 结果
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α 含量相较于对照组均有显著上升,IL-1 含量也有
2.1 BDE-20 对肠道组织形态的影响 随暴露浓度的升高显著上升的趋势,提示肠道内有
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通 过 H & 染色观 察 BDE-20 对斑马鱼肠道 炎症的发生。此外,6 和 600 µg/ 暴露组还观察到
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组织形态学的影响( 图 1)。肠壁和肠绒毛的完整性 了肠道 内 LP 的显著上升,表明高浓 度 BDE-20 暴
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是衡量肠道健康的重要指标。H & 染色显示,28 露后会增加肠道组织内毒素的含量。与对照组相
d 暴露后,BDE-20 对斑马鱼肠道组织有明显的损伤 比,6 µg/ 暴露组 的 IL-1 和 LP 含量也有上升趋
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作用。与对照组相比,暴露组肠道的肠壁厚度明显 势,但无统计学意义。
变薄,且在肠壁外纵肌部位开始出现空泡化现象 2.4 BDE-20 对基因表达的影响
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〔 图 1(c)、 图 1(f),红色箭头〕,600 µg/ 暴露组还观 BDE-20 对斑马鱼肠道内屏障功能相关基因表
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察到肠壁破损〔 图 1(d),红色箭头〕。暴露组肠绒毛 达的影响如 图 4(a 所示。结果表明,BDE-20 暴露
)
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也出现了明显的损伤,与对照组相比,60和 600 对斑马鱼肠道 ZO-1 mRN 相对表达量无显著影
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µg/ 暴露组肠绒毛内部出现空泡化现象〔 图 1(g)、 响。6 µg/ 浓度暴露未显著影 响 Claudin- 和 Tjp2a
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图 1(h),蓝色箭头〕,6 µg/ 暴露组观察到肠绒毛纤 mRN 的表达,但显著影响 了 Muc2.1 mRN 的表
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毛轻微破损〔 图 1(f),绿色箭头〕,600 µg/ 暴露组观 达。与对照组相比,6 和 600 µg/ 浓度暴露后,肠
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察到肠绒毛纤毛严重破损〔 图 1(h),绿色箭头〕。 道 内 Claudin-2、Tjp2 和 Muc2.1 mRN 相对表达量
a
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2.2 BDE-20 对氧化应激相关指标的影响 均发生了显著地下调。
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BDE-20 暴露对肠道氧化应激相关指标的影响 BDE-20 对斑马鱼肠道内炎症通路相对基因表
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如 图 2 所示。与对照组相比,6 µg/L BDE-20 暴露 达量的影响如图 4(b 所示。观察到经 6 和 600
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后 RO 含量虽上升,但变化并没有显著差异,而 µg/ 浓度 的 BDE-20 暴露后,Akt2、Tlr-4、Nfkb 及
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6 和 600 µg/ 暴露 组 RO 含量显著升高。此外, IL-10 mRN 相对表达量均发生了上调。60 µg/ 暴
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注:红色箭头标注的为肠壁;蓝色箭头标注的为肠道出现空泡化现象;绿色箭头标注的为肠绒毛出现破损现象。
图 1 斑马鱼肠道切片苏木精-伊红 (H & E) 染色后的组织形态
Fig.1 Tissue morphology after haematoxylin-eosin (H & E) staining in intestinal sections from zebrafish